支原体PCR检测试剂盒具有很高的特异性和敏感性,可Z大程度地减少假阳性,同时确保覆盖200多种支原体菌株,以便在1小时内快速可靠地常规筛选细胞培养物。支原体是非常不受欢迎的,容易获得并且因难以捉摸的感染发作而臭名昭著。它可以在分子水平上改变感染的细胞,导致细胞形态和生长特征的明显变化。建议及时检测细胞培养物中的支原体,以阻止广泛的污染并节省昂贵的消除工作。MasterMix含有凝胶上样染料,便于凝胶电泳上样。

 

支原体检测试剂盒组分:

产品组分 数量

BlasTaq™ 2X PCR MasterMix 1.25 毫升

引物混合物 100 微升

阳性对照 250 微升

无核酸酶H2O 1.0 毫升

 

艾美捷支原体检测试剂盒(ABS-G238)方案:

1.在筛选前,细胞应在培养中至少保持48-72小时不受干扰,并且至少达到80%的密度。直接从培养中收集2.5微升。

2.使用前混合各个组分,并在冰上组装反应。

3.轻轻混合反应物并短暂离心。按照标准PCR的热循环条件进行操作:

4.进行PCR后,将反应体系保持在4C,或存储在-20C直至使用。

5.通过琼脂糖凝胶电泳分析扩增产物。

6.通过乙酰胺或SafeView™(产品编号G108)染色进行可视化观察。

 

一般说明:

PCR产物大约500碱基对(bp)的长度表明所测试的细胞培养受到了支原体的污染。请注意,PCR产物的长度会根据不同的支原体菌株在370-550碱基对之间变化。

在进行PCR之前,应将反应混合物保持在冰上,并在反应混合物准备好后立即开始PCR。

 

为什么要检测细胞中的支原体?

由于支原体的体积很小,它可能存在于你的生长培养基中而无法被肉眼检测到。这可能会由于其对以下方面的影响而导致实验中出现重大错误:增殖、新陈代谢、基因合成与处理、粘附特性等等。

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