CellMosaic的Phenyldiazirine oxLink™ (T2A10) 是CellMosaic开发的一种专有的光交联试剂,用于研究生物分子间的相互作用。
这种试剂将高效的卡宾生成基团苯基二氮丙啶与方便的肟可逆化学交联以及超亲水的AqueaTether™ (AqT™) 链接器结合起来。这些结构特点使得与传光交联试剂相比,使用这种试剂具有高度的优势。
三氟甲基苯基二氮丙啶(TFMP)基团:TFMP在360纳米左右光解,此时对生物分子的光损伤最小。生成的卡宾在皮秒内在邻近的生物分子伙伴中插入C-H键。由于电子吸引的三氟甲基基团使中间的重氮异构体稳定,因此在正常的标记条件下未检测到任何副产品。
含有酮或醛基团的任何生物分子的化学交联的氨基氧基团。氨基氧-酮连接在肽化学中是正交的,并将允许高度选择性的基于固定相的交联产物的分离。特别是,选择性纯化方法将允许在复杂基质中表征蛋白质复合物,如血浆、细胞膜和细胞裂解物,这些样本可能含有自由硫醇,这些硫醇会干扰标记和纯化过程。图1显示了如何使用可逆的oxLink™来交联相互作用的生物分子伙伴并鉴定交联位点或检测相互作用伙伴。
亲水性AqT™链接器:TFMP基团高度疏水,使用传统的乙烯和乙二醇型链接器标记的生物分子倾向于聚集并破坏标记的蛋白质的稳定性。T2A10 AqT™链接器由两个苏丁醇连接而成,大大增强了oxLink™的亲水性(图2)并提高了其水溶性(>27 mg/mL)。该分子还具有更少的非特异性疏水相互作用,允许高载荷的苯基二氮丙啶基团。
艾美捷CellMosaic-Phenyldiazirine oxLink™ (T2A10)化学信息:
化学品名称:Phenyldiazirine sxLink™ (T2A14)
化学式:不适用
分子量:633.66 Da
CAS编号:不适用
规格:
外观:1.5毫升离心管中的白色冻干粉末
储存温度:-20C
纯度:高效液相色谱法测定,纯度≥ 95 %
产品应用:
标记含有醛或酮基团的生物分子
通过光交联研究动态生物分子相互作用(例如,研究生物复合物和网络、蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质-DNA相互作用、小配体-蛋白质相互作用)
产品关键特性:
高度水溶性(>27 mg/mL)和生物相容性
高载荷量,最小化聚集
包含能够形成可逆链接的正交肽化学交联组
包含高效的卡宾生成光交联组
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图1. 使用水溶性Phenyldiazirine oxLink™ (T2A10)的oxLink™工作流程
图2. 4-[3-(三氟甲基)-3H-二氮杂茚-3-基]苯甲酸(TFDB,红色,在DMSO中)和oxLink™(蓝色,在水中)的C18高效液相色谱分析。
CellMosaic-Phenyldiazirine oxLink™ (T2A10)文献参考:
Protein crosslinking reviews: a) Brunner, J. (1993) Annu. Rev. Biochem. 62, 485−514. b) Freedman, R. B. (1979) Trends Biochem. Sci. 193–197. c) Herrmann, J. M., Westermann, B., Neupert, W. (2001) Methods Cell Biol. 65, 217–230. d) Fancy, D. A. (2000) Curr. Opin. Chem. Biol. 4, 28–32. e) Fasold, H., Klappenberger, J., Meyer, C., Remold, H. (1971) Angew. Chem. Internat. Edit. 10, 795–801. f) Bayley, H. Photogenerated Reagents in Biochemistry and Molecular Biology, Vol. 12. Elsevier, Amsterdam, Neth, 1983.
3-Trifluoromethyl-3-phenyldiazirine reference: Brunner, J., Senn, H. & Richards, F. M. (1980) J. Bio. Chem. 255, 3313−3318.
CellMosaic的生物偶联物被用作研究工具、诊断试剂,以及药物的新型载体,如抗体药物偶联物(ADCs)。艾美捷科技是CellMosaic的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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