BPS-LysA™通用PARylation检测试剂盒是一种基于夹心ELISA的试剂盒,旨在测量和量化细胞提取物中存在的总聚ADP核糖基化量。该试剂盒采用方便的96孔格式,包含所需的所有试剂,包括标准杆数标准,该标准允许建立定量测量的标准曲线。它含有足够的抗体、阻断缓冲液和检测试剂,以96孔板的形式测量细胞提取物中的PARylation水平。它还包括细胞裂解物作为测定性能的对照。
注:该测定仅适用于聚ADP核糖基化检测。该测定在100 pM至20 nM的PARylation范围内呈线性。
图1:LysA™通用PARylation检测工作流程图。
使用抗PAR抗体来涂覆96细胞板。来自细胞的裂解物被添加到包被的孔中,因此存在于细胞裂解物中的标准杆数(PARylated proteins)被抗体捕获。随后用抗PAR一级抗体和二级HRP-标记抗体孵育。添加化学发光的HRP底物提供了发光信号,其与细胞提取物中存在的标准杆数的量直接相关
艾美捷LysA通用PARylation检测试剂盒:
货号:82123
同义词:PARP1, PARP2, PARG
检测试剂盒格式:化学发光法
物种:人类
未提供的必需材料:
改良RIPA裂解缓冲液(中等强度)(BPS Bioscience #82126)
LysA™蛋白酶抑制剂鸡尾酒试剂盒(BPS Bioscience #82199)
ADP-核糖基化循环抑制剂混合物(BPS Bioscience #82130)
储存/稳定性:按照指示储存材料,此检测试剂盒在收到之日起6个月内性能最佳。
应用:
量化培养细胞中PAR的总水平。
在培养细胞中筛选或确定PARP或PARG抑制剂的IC50。
在细胞模型中验证PARP或PARG抑制剂。
运输温度:-80C
此检测不允许检测蛋白质上的单(ADP-核糖)(MAR)修饰。
避免使用SDS或其他强烈变性洗涤剂,浓度> 0.1%。
此检测兼容至多2% v/v的总洗涤剂存在,以及至多1% DMSO。
避免使用浓度>10 mM的叠氮钠和还原剂,如二硫苏糖醇或-巯基乙醇。
LysA通用PARylation检测试剂盒相关产品:
PARPtrap™PARP1检测试剂盒
PARPtrap™PARP2检测试剂盒
PARG荧光检测试剂盒
PARPtrap™PARP1和PARP2组合检测试剂盒
文献参考:
Marques M., et al., 2019 Oncogene 38 (12): 2177-2191.
James D. I., et al., 2016 ACS Chem Biol 11 (11): 3179-3190.
Drown B. S., et al., 2018 Cell Chem Bio 25 (12): 1562-1570.
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